HPLC

Siglas en inglés de cromatografía de líquidos de alta eficiencia (o de alta resolución o de alto desempeño), High Performance Liquid Chromatography. En sí, se trata de un método en el que es posible llevar a cabo la separación de una mezcla compleja de sustancias a partir de su reparto diferencial entre una fase estacionaria sólida y una móvil líquida (v. cromatohgrafía). Es equivalente a una cromatografía de líquidos (v.) clásica, en las que la fase estacionaria está conformada por un lecho pulverizado de algún material que retiene a los eluatos (como gel de sílice). La diferencia radica en que en la técnica de HPLC el tamaño de partícula es ostensiblemente menor (hasta 3 µm contra 35 - 500 µm para la cromatografía de líquidos clásica), por lo que es necesario forzar al disolvente para que pueda migrar a través de las partículas ejerciendo una considerable presión (de hasta 10000 lb/in², equivalente a más de 680 atmósferas). La reducción de tamaño sin embargo incrementa la eficencia de separación de manera dramática. La fase estacionaria comercialmente está disponible dentro de tubos de acero (llamados columnas) que pueden soportar las enormes presiones a las que estará sometido el sistema. Los equipos cuentan con una serie de sistemas de seguridad que les permite ser operados sin exposición a riesgos. Las presiones requeridas se alcanzan con bombas reciprocantes o de desplazamiento. El gas impulsor es helio o nitrógeno de ultra alta pureza. El equipo cuenta con detectores para las sustancias que abandonan el medio de separación midiendo alguna propiedad física de los eluatos (fluorescencia, conducción eléctrica, índice de refracción, etc.). Los actuales equipos, llamados cromatógrafos de HPLC o HPLC simplemente, cuentan con un equipo de cómputo a partir del cual es posible controlar los diferentes parámetros que permiten hacer eficiente una separación; asi mismo, los resultados de la separación se expresan mediante un cromatograma (v.) en el que es posible valorar los resultados alcanzados. Algunas autoridades en la materia recomiendan que, manteniéndose las siglas, la técnica sea definida como cromatografía de líquidos a alta presión (high pressure liquid chromatography) debido a que, si bien es cierto que las separaciones con esta técnica proceden con mayor eficiencia que la cromatografía de líquidos clásica, no todas las aplicaciones de la técnica de HPLC necesariamente están basadas en una alta eficiencia. Sin embargo, el término de performance se ha generalizado y es el que se prefiere universalmente.

Véase cromatografía líquida de alta presión.